液相色譜柱的分類

　　液相色譜柱的分類：(按色譜固定相基質(zhì)分)
 

　　一.硅膠基質(zhì)：
 

　　1.反相色譜柱：
 

　　反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ)，表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。
 

　　反相色譜所使用的流動相極性較強，通常為水，緩沖液與甲醇，已腈等混合物。
 

　　樣品流出色譜柱的順序是極性較強組合先被沖出，而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留。
 

　　常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
 

　　2.正相色譜：
 

　　正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)，以及其他具有極性官能團，如胺基團(NH2,APS)和氰基團(CN，CPS)的鍵合相填料。
 

　　由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團的極性較強，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小，即極性強弱的組份先被沖洗出色譜柱。
 

　　正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低，如：正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene  Chloride)等。
 

　　3.離子交換色譜柱：以磺化交聯(lián)強陰/陽離子鍵合硅膠色譜柱，常用規(guī)格：強陰離子色譜柱(SAX)，強陽離子交換色譜柱(SCX)
 

　　二 .聚合物基質(zhì)：
 

　　聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要優(yōu)點是在PH值為1～14均可使用。相對與硅膠基質(zhì)的C18填料，這類填料具有更強的疏水性；大孔的聚合物填料對蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。現(xiàn)在的聚合物填料的缺點是相對硅膠基質(zhì)填料，色譜柱柱效較低。
 

　　三.其他無機填料：
 

　　其它HPLC的無機填料色譜柱也已經(jīng)商品化。由于其特殊的性質(zhì)，一般于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐漸成為反相色譜填料。這種填料的分離不同與硅膠基質(zhì)烷基鍵合相，石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ)，不再需其它的表面改性，該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強，石墨化碳可用于分離某些幾何導(dǎo)構(gòu)體，又由于HPLC流動相中不會被溶解，這類柱可在任何PH與溫度下使用。氧化鋁也可用于HPLC，
 

　　氧化鋁微粒剛性強，可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床，其優(yōu)點是可在PH高達12的流動相中使用。
 

　　但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強，應(yīng)用范圍受到一定的限制，所以未能廣泛應(yīng)用，新型氧化鋯填料也可用于HPLC，商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱，應(yīng)用PH范圍1～14，溫度可達100℃。由于氧化鋯填料幾年才開始研究，加之面臨的實驗難度，其重要用途與優(yōu)勢尚在進行中。