大賽璐手性柱還包括反相的系列，同時鍵合相的手性柱正相和反相都能用，只是要求在正相和反相流動相之間進行切換的時候要用異丙醇小流速的過渡，因為大賽璐手性柱壓力都不能超過100bar。

 

　　手性分離重要的是選擇一根好的手性柱，做手性分析的都知道，大賽璐的手性柱目前占有率高，根據用途分為多種不同的型號，大家熟悉的可能是OD－H。

 

　　另外需要注意的是鍵合相手性柱的記憶效應，即流動相使用不同種類的溶劑切換時，柱效可能會下降，解決方法就是用DMF做溶劑對色譜柱進行清洗。反相常用的溶劑包括水、甲醇、乙腈和乙醇，每種溶劑都為樣品分離提供了選擇性。

 

　　有四種填料，結構類似，對應的色譜柱分別是OD、AD、OJ和AS，粒徑10um，后來填料粒徑變為5um，就是賣的多、使用范圍廣的柱子，號稱四大金剛，分別是OD－H、AD－H、OJ－H和AS－H，在柱子名稱后邊加“－H”，這些柱子都只能做正相使用。

 

　　手性固定相分為π電子接受型和π電子提供型兩類。常見的π電子接受型固定相是由（R）－N－3，5－二硝基苯甲酰苯基甘氨酸鍵合到γ－氨丙基硅膠上的制成。此類刷型手性色譜柱可以分離許多可提供π電子的芳香族化合物，或用氯化萘酚等對化合物進行衍生化后進行手性分離。

 

　　π電子供給型固定相常見的是共價結合到硅膠上的萘基氨基酸衍生物，這種固定相要求被分析物具有π電子接受基團，例如二硝基苯甲酰基。醇類、羧酸類、胺類等，可以用氯化二硝基苯甲酰、異腈酸鹽、或二硝基苯胺等進行衍生化后，用π電子供給型固定相達到手性分離。