AGP 色譜柱分析瑞格列奈

                                                                   

 

 瑞格列奈拼音名：Ruigelienai    英文Repaglinide：Repaglinide：                                                                    C27H36N2O4      452.59           本品為S（＋）-2-乙氧基-4-{2-[（3-甲基-1（2-（1-哌啶基）苯基）丁基）氨基]-2-氧代乙基）苯甲酸。按干燥品計算，含C27H36N2O4不得少于99.0％。         【性狀】本品為白色或類白色結晶性粉末；無臭。           本品在氯仿中易溶，在乙醇或丙酮中略溶，在水中幾乎不溶，在0.1mol/L鹽酸溶液中微溶。           熔點  本品的熔點（中國藥典2000年版二部附錄Ⅵ C）為128～132℃。           比旋度  取本品，精密稱定，加乙醇溶解并制成每1ml中含10mg的溶液，依法測定（中國藥典2000年版二部附錄Ⅵ   E），比旋度為＋7.6°～＋9.2°           吸收系數  取本品適量，精密稱定，加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并制成每1ml中含20μg的溶液，照分光光度法（中國藥典2000年版二部附錄Ⅳ A），在243nm波長處測定吸收度，吸收系數（E1% 1cm）為221～235。         【鑒別】（1）取本品約50mg，置干燥試管中，加丙二酸30mg，醋酐0.5ml，置熱水浴中加熱數分鐘，溶液顯橙黃色紅棕色。           （2）取吸收系數項下的溶液，照分光光度法（中國藥典2000年版二部附錄Ⅳ A），在243nm與298nm的波長處有大吸收，在229nm的波長處有小吸收。           （3）本品的紅外光吸收圖譜應與對照品的圖譜一致。         【檢查】氯化物  取本品0.5g，加丙酮25ml使溶解，依法檢查（中國藥典2000年版二部附錄Ⅷ  A），與標準氯化鈉溶液5.0ml加丙酮25ml制成的對照液比較，不得更濃（0.01％）。           有關物質  取本品適量，加流動相溶解并制成每1ml中約含0.10mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，加流動相稀釋制成每1ml中含1μg的溶液，作為對照溶液。照液相色譜法（中國藥典2000年版二部附錄Ⅴ D）試驗，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以醋酸銨緩沖液（取醋酸銨3.85g，加水1000ml，使溶解，用冰醋酸調節pH值4.0）-甲醇（20:80）為流動相，檢測波長為243nm，理論板數按瑞格列奈峰計算，應不低于2000。精密量取對照溶液20μl注入液相色譜儀，調節儀器靈敏度，使主成分峰高為滿量程的20％～30％，精密量取上述兩種溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄供試品溶液色譜圖主成分峰保留時間的3倍，供試品溶液的色譜圖中如顯雜質峰，量取各雜質峰面積的總和，不得大于對照溶液主成分峰的峰面積（1.0％）。           左旋異構體  取本品約20mg，置10ml量瓶中，加乙醇溶解并稀釋刻度，搖勻，精密量取適量，加磷酸鹽緩沖液制成每1ml中含0.20mg的溶液作為供試品溶液；精密量取供試品溶液1ml，置100ml量瓶中，加磷酸鹽緩沖液稀釋刻度，搖勻，作為對照溶液；另取消旋瑞格列奈對照品適量，加乙醇溶解并稀釋制成每1ml中含0.10mg的溶液，作為消旋對照品溶液。照液相色譜法（中國藥典2000年版二部附錄Ⅴ D）試驗，采用手性色譜柱（ChromTech AGP 100×4.0mm5μm），以磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫鉀2.72g，加水800ml使溶解，用氫氧化鈉試液調節pH值7.0，加水稀釋1000ml，即得）為流動相A，乙腈為流動相B，檢測波長為240nm。按如下方式進行梯度洗脫。                時  間        流動相A        流動相B               0.0分鐘           90％                 10％               5.0分鐘           75％                 25％             10.0分鐘           75％                 25％           精密量取消旋對照品溶液20μl注入液相色譜儀，各組分出峰的順序應依次為瑞格列奈和左旋異構體，其分離度應符合要求，理論板數按瑞格列奈峰計算應不低于2000。精密量取對照溶液20μl注入液相色譜儀，調節儀器靈敏度，使主成分峰高為滿量程的25％，再精密量取供試品溶液和對照溶液各20μl分別注入液相色譜儀，記錄供試品溶液色譜圖主成分峰保留時間的3倍，供試品溶液的色譜圖中如顯左旋異構體峰，其峰面積不得大于對照溶液主成分峰的峰面積（1.0％）。           二氯甲烷與正己烷  精密稱取本品適量，加N，N-二甲基甲酰胺制成每1ml中約含100mg的溶液作為供試品溶液；另取二氯甲烷、正己烷適量，加N，N-二甲基甲酰胺制成含二氯甲烷、正己烷分別為10μg/ml作為對照品溶液；照氣相色譜法（中國藥典2000年版二部附錄Ⅴ E），用5％二苯基-95％二甲基硅氧烷共聚物為固定相的毛細管柱（30m×0.53mm），進樣口溫度150℃，檢測器溫度為240℃，柱溫為40℃，分流進樣。相對標準偏差不得過10％。含二氯甲烷不得過0.06％，含正己烷不得過0.029％。           干燥失重  取本品，以五氧化二磷為干燥劑，在80℃減壓干燥恒重，減失重量不得過0.5％（中國藥典2000年版二部附錄Ⅷ L）。           熾灼殘渣  取本品0.50g，依法檢查（中國藥典2000年版二部附錄Ⅷ N），殘渣不得過0.1％。           重金屬  取熾灼殘渣項下的殘渣，依法檢查（中國藥典2000年版二部附錄Ⅷ H 第二法），含重金屬不得過百萬分之二十。         【含量測定】取本品約0.3g，精密測定，加冰醋酸20ml使溶解，加結晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定溶液顯藍色，并將滴定結果用空白試驗校正，每1ml的高氯酸滴定液（0.1mol/ L）相當于45.26mg的C27H36N2O4。         【類別】降血糖