使用TSKgel UP-SW3000進行單克隆抗體分析柱

使用TSKgel UP-SW3000進行單克隆抗體分析柱

近年來，抗體藥物市場在逐步擴大，未來的幾年仍將持續發展。越來越多的抗體藥物將會應用到疾病的治療中。尺寸排阻色譜法（SEC）廣泛用于抗體中單體，二聚體，聚集體和片段等的分析和定量中。為實現更高的分離度和更快的分析時間，色譜柱生產廠家優化了填料顆粒化學和色譜柱填充方法,近年來,2μm和亞2μm粒徑SEC色譜柱相繼問世.

通過這種方法使得一些樣品的分析結果得到了改善，但由于一些新型抗體藥物具有高度的疏水性，抗體在色譜柱凝膠基質上的非特異性吸附使得抗體藥物的分析仍然具有一定的挑戰。在本應用指南中，使用TSKgel®UP-SW3000，2μmSEC色譜柱分析單克隆抗體（mAb），并在pH 6.7的磷酸鈉緩沖液中添加15％IPA。如圖所示，峰分離度和保留時間變化均不受影響。

HPLC實驗條件

色譜柱：TSKgel UP-SW3000，2μm，4.6 mm ID x 30 cm

儀  器：Chromeleon®（7.2版）運行的UltiMate®3000 UHPLC系統

流動相：100 mmol / L KH2PO4 / Na2HPO4中的15％IPA，pH 6.7，100 mmol / L Na2SO4、0.05％NaN3

流  速：0.30 mL / min

檢  測：紫外線@ 280 nm

溫  度：30?C

壓  力：22 MPa（最大色譜柱壓力為34 MPa）

進樣量：5μL，4 mg / mL

樣  品：USP mAb標準品

使用TSKgel UP-SW3000進行單克隆抗體分析柱

結果與討論

將USP mAb標準品注射到TSKgel UP-SW3000 4.6 mm ID×30 cm色譜柱上，利用磷酸鈉緩沖液pH 6.7為流動相，樣品具有出色的重現性，如圖1所示。該圖顯示了以0.3 mL / min的流速連續進樣14針USP mAb標準樣品，單體，二聚體，聚集體和碎片峰的保留時間幾乎不變，每次進樣的峰寬和峰形非常一致。

北京綠百草科技發展有限公司成立于1999年，坐落于北京市昌平區企業墅上區，是一家專業經營純化填料、色譜柱、化學試劑和實驗室設備及相關技術服務的科技型企業，產品主要應用于制藥、生物、食品、環境和農業等領域。憑借較好的產品和服務，綠百草科技與廣大客戶建立了長期穩定的戰略合作關系，被眾多企業和科研機構認定為“供應商"，得到了政府部門的關懷和有力支持。
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